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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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Elisa試劑盒
細(xì)胞系
生化試劑
進(jìn)口PCR試劑盒
ELISA檢測試劑盒
質(zhì)粒
熒光定量PCR試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品
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大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1復(fù)蘇操作流程

時(shí)間:2021/7/13閱讀:1016
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大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1復(fù)蘇操作流程:

1. 準(zhǔn)備工作,開水浴鍋,預(yù)熱試劑,超凈工作臺(tái)紫外照射 30min,找到對(duì)應(yīng)細(xì)胞在液氮罐中的位置
2. 紫外照射后風(fēng)機(jī)吹 10min 后,酒精擦拭臺(tái)面,放入試劑和離心管,取 15ml 離心管,加入 9ml 培養(yǎng)液
3. 在液氮罐中取出細(xì)胞,先擰松放液氮,再擰緊,將凍存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后取出,1-2min
4. 將凍存管噴酒精后放入超凈臺(tái)內(nèi),擦干管壁,用 1ml 頭將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到已加培養(yǎng)液的離心管中
5. 800-1000rpm 離心 5min,注意配平
6. 將離心好的細(xì)胞棄上清,加入 5ml *培養(yǎng)基重懸,用移液管吹打 8-10 次, 避免產(chǎn)生氣泡,將細(xì)胞懸液接種到 10cm 培養(yǎng)皿中,補(bǔ)加 5ml 培養(yǎng)液
7. 混勻,十字法或者 8 字法
8. 將混好的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

GV3101(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
GV3101(pSoup-p19)感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
GV3101(pSoup-p19)感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
EHA105感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
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AGL1感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
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AGL1(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
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LBA4404感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
LBA4404感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
EHA101感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
EHA101感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)
GV3101 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

 

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