肝素親和填料使用說(shuō)明

Heparin NUPharose FF和 Heparin NUPharose HP是肝素親和填料， 是經(jīng)典的瓊脂糖凝膠層析介質(zhì)基球 NUPharose上鍵合 肝素 而成。 FF為 Fast Flow的縮寫，具備快流速的特點(diǎn)，可用于快速純化蛋白質(zhì)，適用性廣，易于放大。 HP為 High Performance的縮寫，具備分辨率高的特點(diǎn)。 肝素親和的原理較為復(fù)雜， 一般認(rèn)為 肝素與蛋白的結(jié)合是離子相互作用、氫鍵與 范德華力 等多種驅(qū)動(dòng)力共同作用的結(jié)果。 肝素填料 主要用于凝-血酶 III、凝血-因子、脂蛋白、酯酶、激素、干擾素等的分離純化。 也有 文獻(xiàn)報(bào)道將肝素填料用于外泌體的純化。產(chǎn)品留了瓊脂糖極-好的親 水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有載量高，非特異性吸附少，流速快等特點(diǎn)， 適用于各種肝素親和層析。

使用方法 參考

1、色譜柱裝填

以下闡述與層析系統(tǒng)連接時(shí)，填料的色譜柱裝填方法。

1 所有需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣，液體最好做脫氣處理。

2）填料 用量計(jì)算： 通過(guò)沉降定量填料體積， 需要的沉降 填料 體積 =柱體積× 壓縮比（也稱壓縮因子） 。 沉降體積是指填料在 20%乙醇保存液中自然沉降 完-全 讀取的穩(wěn)定體積。 Heparin NUPharose FF的壓縮比為 ~1.15 Heparin NUPharose HP的壓縮比為 ~1.20。為使達(dá)到裝柱比，可通過(guò)柱頭下壓的方法，也可以通過(guò)高流速 壓柱。

3）填料 清洗： 將 填料 懸液充分搖勻后量取 相應(yīng)體積， 抽去液體，并用約 3倍填料體積的 純化水洗滌，重復(fù) 3次 ，以除去保存液 。

4）裝柱 填料 懸液準(zhǔn)備：將 填料 轉(zhuǎn)移 到 適當(dāng)?shù)娜萜髦?，?/p>