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人類淋巴母細胞建株方法

時間:2015-6-19閱讀:408
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人類淋巴母細胞建株方法

l、4ml肝素抗凝血于離心管中,加入2ml RPMI 1640。

2、混勻后沿管壁緩慢加到預置有4ml淋巴細胞分離液的液面上靜置30min。

3、1500rpm,15min,吸取白細胞層(第二層)于另一離心管中。

4、加RPMI 1640 5ml洗滌白細胞兩次。

5、將白細胞接種至1ml RPMI 1640培養(yǎng)基中,加入10μl環(huán)胞霉素和100μl的EB(EB病毒)液,混勻。

6、水浴搖床,40次/分,37℃,3hr。

7、1500rpm,15min。將細胞接種至1ml培養(yǎng)基中(內(nèi)含*1mM/ml)加入10μl環(huán)胞霉素,輕輕混勻,37℃培養(yǎng)。

8、5天后觀察細胞轉(zhuǎn)化和生長情況,決定是否半量換液。一般半量換液l—2次,并維持環(huán)胞霉素的濃度。

9、待轉(zhuǎn)化細胞數(shù)量明顯上升,并出現(xiàn)細胞團塊后,可轉(zhuǎn)入25ml細胞培養(yǎng)瓶中,加1—2ml培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)10—15天,一般每隔3—4天觀察一次,決定是否換液,傳代。

10、細胞生長達一定數(shù)量后凍存,凍存前應(yīng)進行核型分析和存檔。

英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員6(TRPM6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Mus musculus (Mouse) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員1(TRPM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
細胞英文名稱 Mus musculus (Mouse) 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Bos taurus; Bovine (Cattle) 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

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