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技術(shù)文章

今日知識推薦-大腸埃希氏菌初步生化與鑒定

閱讀：412發(fā)布時間：2014-12-18

初步生化試驗

在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上挑取5 個～10 個典

型或可疑菌落，分別接種TSI 瓊脂，同時接種MUG-LST 肉湯，并用已知MUG陽性的大腸埃希氏菌株做對照，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。必要時進行氧化酶試驗和革蘭氏染色。在TSI 瓊脂中，典型菌株為斜面與底層均呈黃色，產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣，不產(chǎn)生硫化氫（H2S）。置MUG-LST 肉湯管于長波紫外燈下觀察，MUG陽性的大腸埃希氏菌株應(yīng)有熒光產(chǎn)生，大腸埃希氏O157:H7/NM 無熒光；對分解乳糖且無熒光的菌株，在營養(yǎng)瓊脂平板上分純，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h，并進行下列鑒定。

鑒定

血清學(xué)試驗

在營養(yǎng)瓊脂平板上挑取分純的菌落，用O157:H7 標(biāo)準(zhǔn)血清或O157 乳膠凝集試劑作玻片凝集試驗。對于H7 因子血清不凝集者，應(yīng)穿刺接種半固體瓊脂，檢查動力，經(jīng)連續(xù)傳代3 次，動力試驗陰性，H7 因子血清凝集陰性者，確定為無動力株。

生化試驗

用API20E 生化鑒定試劑盒或VITEK-GNI+檢測卡，按照生產(chǎn)商提供的使用

說明進行。大腸埃希氏菌O157:H7/NM 生化反應(yīng)特征見表。

生化試驗 特征反應(yīng)
三糖鐵瓊脂 底層及斜面呈黃色，H2S 陰性
* 陰性或遲緩發(fā)酵
靛基質(zhì) 陽性
MR-VP MR 陽性，VP 陰性
氧化酶 陰性
西蒙氏檸檬酸鹽 陰性
賴氨酸脫羧酶 陽性（紫色）
*脫羧酶 陽性（紫色）
纖維二糖發(fā)酵 陰性
棉子糖發(fā)酵 陽性
MUG 試驗 陰性（無熒光）
動力試驗 有動力或無動力


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